Avaliação da interação e transmissão do cowpea aphid-borne mosaic vírus vs passiflora edulis f. flavicarpa ( maracujá), canavalia ensiformis (feijão de porco) e vigna unguiculata I. walp. (feijão caupi)

Abstract

O Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV), é o agente causal do endurecimento dos frutos do maracujá, uma doença de grande importância para a cultura, e elevada incidência em regiões produtoras no Estado da Bahia, que é o maior produtor dessa cultura no país. Esse vírus pode ser transmitido aos pomares por meio de tratos culturais, ou por meio de insetos vetores como o pulgão, tornando a doença de difícil controle, por consequência a avaliação da dinâmica da interação do CABMV com seus diferentes hospedeiros tornou-se imprescindível. Foram cultivadas em casa de vegetação vinte e quatro plantas, estas foram divididas em três grupos de oito plantas, sendo cinco inoculadas com CABMV e três utilizadas como controle, inoculadas somente com solução tampão. A inoculação mecânica do vírus nos três grupos foi realizada quando as mudas apresentavam três pares de folhas. No grupo1 a inoculação foi em uma folha de cada planta, no grupo 2 duas folhas e no grupo 3, três folhas. As plantas foram avaliadas diariamente para observação dos sintomas que ocorreram no décimo quinto dia após a inoculação, independente do número de folhas inoculadas. Para extração do RNA total, a coleta das folhas seguiu a dinâmica da divisão da planta em três terços, sendo superior, médio e inferior. Após a coleta, realizaram-se RT-PCR utilizando primers para amplificação do fragmento viral. A presença do fragmento viral foi verificada no terço superior das plantas nos 3 grupos. O segundo experimento foi conduzido em casa de vegetação, onde foram utilizadas dezoito plantas de Vigna unguiculata (Feijão-caupi), nove plantas de Canavalia ensiformis (Feijão-de-Porco) e nove de Passiflora edulis (Maracujá), estas foram divididas em dois grupos. No Banco ativo de Germoplasma (BAG) da Embrapa Mandioca e Fruticultura - Ba foram coletadas amostras de maracujá e feijão de porco, sintomáticas, cuja presença de CABMV foi confirmada em Laboratório via RT-PCR. O tecido foliar de feijão de porco infectado com o CABMV foi utilizado para inoculação mecânica nas plantas do grupo 1 e com tecido de Maracujá infectado no Grupo 2. Após o aparecimento dos sintomas foram coletadas amostras de cada grupo para a extração do RNA total, posteriormente RT-PCR, e eletroforese em gel de agarose, cujo produto da PCR revelou a presença do vírus nos tecidos analisados, confirmando assim a transmissão do CABMV atravéss da inoculação cruzada entre as espécies de feijão caupi, feijão de porco e Maracujá. _________________________________________________________________________________________ The Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV) is the causal agent of woodiness of the fruits of passion, a disease of great importance for culture, and high incidence in producing regions in the state of Bahia, which is the largest producer of this crop in country. This virus can be transmitted to orchards by cultivation, or by insect vectors such as aphids, making the disease difficult to control, hence the evaluation of the dynamics of interaction with their different hosts CABMV became essential. Were grown in a greenhouse twenty-four plants, they were divided into three groups of eight plants, five inoculated with CABMV and three used as control, inoculated only with buffer solution. Mechanical inoculation of the virus in the three groups was performed when the seedlings had three pairs of leaves. In group1 inoculation was in a leaf of each plant, two leaves in group 2 and group 3, three sheets. The plants were evaluated daily for observation of symptoms that occurred on the eleventh day after inoculation, regardless of the number of inoculated leaves. For extraction of total RNA, the collection of leaves followed the dynamics of plant division into thirds, with upper, middle and lower. After collection, RT-PCR was performed using primers for amplification of viral fragment. The presence of viral fragment was verified in the upper third of the plants in the 3 groups. The second experiment was conducted in a greenhouse, where they were used eighteen plant Vigna unguiculata (cowpea), nine plants of Canavalia ensiformis (Bean-of-Pig) and nine Passiflora edulis (passion fruit), these were divided into two groups. In active Germplasm Bank (BAG) of Embrapa Mandioca e Fruticultura - BA samples were collected Passion Fruit and pork beans, symptomatic, whose presence was confirmed in laboratory CABMV via RT-PCR. The pork bean leaf tissue infected with CABMV was used for mechanical inoculation in plants of group 1 and Passion Fruit infected tissue in Group 2. After the onset of symptoms were collected samples from each group for the extraction of total RNA later RT-PCR and agarose gel electrophoresis, whose PCR product revealed the presence of viruses in tissues analyzed, thus confirming the transmission CABMV by cross inoculation of the species of cowpea, beans and pork Passion.