Prevalência do Pineapple mealybug wilt-associated vírus- 1, 2 e 3 (PMWaV) em abacaxizeiros sintomáticos da murcha do abacaxi

Abstract

Originário do Brasil o abacaxizeiro (Ananas comosus) é uma planta de clima tropical pertencente à família Bromeliácea. A produtividade do abacaxizeiro vem sendo altamente prejudicada pela cochonilha Dysmicoccus brevipes que transmite o Pineapple Mealybug Wilt-associated Virus (PMWaV), agente causador da murcha do abacaxi, que leva ao definhamento da planta com posterior morte. O PMWaV é um Closterovirus do gênero Ampelovirus, possui partícula alongada e genoma de RNA fita simples. Atualmente, já foram caracterizadas cinco espécies do vírus PMWaV, denominados PMWaV-1, 2 e 3, 4 e 5, contudo os mais pesquisados são o PMWaV-1, 2 e 3 que se diferenciam pela sequência e organização do genoma. Este trabalho teve como objetivo geral avaliar a prevalência do PMWaV em plantas sintomáticas da murcha do abacaxi, localizados em municípios brasileiros. O objetivo específico consistiu em: (i) indexar as amostras de abacaxizeiros coletadas; (ii) Analisar a infecção associada a um ou mais vírus do PMWaV em uma mesma planta. Foram coletadas 41 folhas de diferentes abacaxizeiros em 13 regiões produtoras, situadas em oito (08) estados brasileiros. A extração do RNA viral das amostras foi feita com base no protocolo fornecido pelo fabricante do Trizol (tampão utilizado na extração). A síntese do cDNA foi feita a partir da transcrição reversa, seguida da amplificação do DNA pela PCR, com a utilização de primers específicos para detecção do PMWaV, sendo por fim analisado pela técnica de eletroforese. Das plantas analisadas, 38 caracterizaram positivas a presença do PMWaV, dessas 19 (ou 28,0%) foram detectadas com a espécie PMWaV-1, 36 (54,0%) com PMWaV-2 e 12 (ou18,0%) com o PMWaV-3, dentro destes resultados apresentam-se também os das infecções mistas detectadas, sendo elas, 11 plantas (ou 53,0%) infectadas pelos vírus PMWaV-1 e 2, três (03) (ou 14,0%) plantas positivas para o vírus PMWaV-2 e 3, zero (00) (ou 0,0%) plantas para os vírus PMWaV-1 e 3 e sete (07) (ou 33,0%) plantas constando as três espécies do PMWaV. O estudo da prevalência dos vírus em questão tem grande importância para uma visão da real situação destes organismos nos plantios e expor estratégias de controle e de diagnose da murcha do abacaxizeiro. _________________________________________________________________________________________ Originally from Brazil, the pineapple (Ananas comosus) is a tropical plant belonging to the Bromeliad family. Productivity of pineapple has been highly hindered by Dysmicoccus cochineal brevipes which transmits the Pineapple Mealybug Wilt -associated Virus (PMWaV) , the causative agent of wilt of pineapple, which leads to wilting with subsequent death . The PMWaV is a closterovirus genus Ampelovirus, has elongated and single-stranded RNA genome particle. Currently, five kinds of PMWaV virus - called PMWaV 1, 2, 3, 4 and 5, however the most researched are the PMWaV-1, 2 and 3 which differ in the sequence and organization of the genome have been characterized. This work had as main objective to evaluate the prevalence of PMWaV in symptomatic plants wilt of pineapple, located in municipalities. The specific objective was to: (i) indexing the samples collected pineapple, (ii) analyze the infection associated with one or more virus PMWaV in one plant. 41 different pineapple leaves were collected in 13 producing regions, located in eight (08) states. The extraction of viral RNA from the samples was based on the protocol provided by the Trizol (used in the extraction buffer) manufacturer. The synthesis of cDNA was made from reverse transcription followed by DNA amplification by PCR, using specific primers for detection of PMWaV, and finally analyzed by electrophoresis. Plants analyzed, 38 have characterized the presence of positive PMWaV , these 19 (or 28.0 %) were detected with PMWaV - 1 , 36 species (54.0 %) with PMWaV - 2:12 (ou18 , 0 %) with the PMWaV -3 within these results are also presented from the detected mixed infections , which were 11 plants (or 53.0 %) infected with viruses 1 and 2 PMWaV - three (03) (or 14.0 %) for positive - PMWaV 2 and 3, zero (00) (or 0.0%) for plants 1 and 3 PMWaV - seven (07) (or 33.0%), plant viruses consisting of three species plant virus PMWaV. The study of the prevalence of the virus in question is of great importance for an overview of the actual situation of the genetic variability of these organisms and expose control strategies and diagnostic wilt of pineapple.