Controle da Antracnose in vitro e in vivo em frutos de mamoeiro com o uso de extrato foliar de mamão

Abstract

O mamão (Carica papaya L.) é uma das principais frutíferas cultivadas no Brasil. Um dos fatores limitantes à sua produção e comercialização é a vulnerabilidade a uma grande quantidade de doenças. A antracnose, causada por Colletotrichum spp é responsável por grandes perdas nessa cultura, e na maioria das vezes o controle dessa doença é realizado com uso de fungicidas sintéticos em pré e pós-colheita isso pode acarretar resíduos em frutos. Por esse motivo é importante avaliar substâncias alternativas para o controle da antracnose. Este trabalho teve como objetivo avaliar se o extrato de diferentes polaridades, obtidos a partir da folha do mamão, possui ação fungicida e/ou fungitóxica no controle pós-colheita da antracnose em frutos de mamoeiro. Nesse trabalho os extratos hidroetanólicos de folhas de Carica papaya obtidos por hidrodestilação foram fracionados com solventes orgânicos de diferentes polaridades resultando nas frações hexano, éter etílico, acetato de etila, n-butílico e aquosa. Os efeitos fungitóxico e fungicida dos extratos foliares foram avaliados por meio do teste in vitro. No teste in vivo, foram selecionadas duas frações dos extratos foliares que apresentaram o maior Percentual de Inibição de Crescimento Micelial (PIC). Os extratos foram aplicados por aspersão nos frutos e foram determinadas a severidade, expressa pelo cálculo da Área Abaixo da Curva do Progresso da Doença (AACPD) e do Índice da Velocidade de Crescimento Micelial (IVCM), e incidência da doença em frutos de mamão, avaliada pela quantificação do número de lesões por fruto. Para o teste in vitro utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial de 6 x 5 x + 3, sendo seis frações, cinco concentrações com quatro repetições e um controle (meio com fungo). Foi realizada análise de regressão e posterior ajuste dos modelos matemáticos para as concentrações dos extratos. O ensaio in vivo foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 5 + 3, sendo dois extratos, cinco concentrações e três testemunhas (com inoculação do fitopatógeno), com duas repetições experimentais. Foram avaliados a influência dos tratamentos na qualidade dos frutos através das análises de pH; do teor de sólidos solúveis; acidez titulável, firmeza e perda de peso. Os resultados do experimento foram submetidos à análise de variância, quando constatada significância, por intermédio do teste F, as médias foram comparadas pelo Teste de Scott-Knott ao nível de 5 % de probabilidade. O extrato aquoso, a partir da concentração de 2000 mg mL-1 , foi eficiente em controlar o crescimento do Colletotrichum spp in vitro, seguido dos extratos etér etílico, hexano e bruto. Entre esses três, o extrato bruto foi selecionado para os testes in vivo por apresentar maior rendimento do processo. Variações de extratos e concentrações não alteraram significativamente as propriedades físico-químicas firmeza (kg cm-2 ), sólidos solúveis totais (ºBrix) e perda de massa (%) quando comparadas à testemunha. Contudo, o tratamento in vivo com o Tween 20 ou mesmo associado ao extrato aquoso reduziu o aparecimento de sintomas de antracnose em frutos de mamão frescos. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT Papaya (Carica papaya L.) is one of the main fruits cultivated in Brazil. One of the most limiting factor in production and marketing is susceptibility to a wide range of diseases. Anthracnose, caused by Colletotrichum spp., leads to many losses and is considered one of the most economically important disease, where fungicides is used as main control and therefore, other substances in fungicides should be sought out as an alternative to control measures. The objective of the present work was to evaluate the effect of papaya leaf extracts with different polarities in the fungicide of fungitoxic property in the post-harvest control of papaya fruits. Hydroethanol extracts from Carica papaya leaves obtained from hydrodistillation were fractioned with organic solvents with different polarity resulting in hexane, ethyl ether, ethyl acetate, n-butyric and aqueous phase fractions. The fungitoxic and fungicide effects of the leaf extracts were evaluated in vitro. In the in vivo test, two fractions of the leaf extracts that presented the highest percentage of mycelial growth inhibition (PIC) were selected. The extracts were applied by spray on the fruits and the severity was determined, expressed as the area under the disease progress curve (AUDPC) and the Speed Index of Mycelial Growth (MIGS), and incidence evaluated by quantification of the number of lesions per fruit. The experimental design for the in vitro test was in complete randomized blocks in 6 x 5 + 3 factorial scheme, with six fractions, five concentrations with four replicates and a control (medium with fungus). Regression analysis and further adjustment of the mathematical models for the extract concentrations, were carried out. The in vivo assay was carried out in complete randomized design in 2 x 5 + 3 factorial scheme with two extracts, five concentrations and a control (with inoculation of the pathogen), with two experimental replicates. To assess the influence of treatments on fruit quality, the following analyzes were performed, pH; soluble solids; titratable acidity, firmness and weight loss. Results of the experiment were submitted to analysis of variance and, given significance by the F test, the averages were compared by Scott-Knott test at 5% probability. The aqueous extract beyond the concentration of 2000 mg mL-1 was efficient to control the growth of Colletotrichum spp in vitro, followed by the ethyl ether, hexane and crude extracts. Among these three, the crude extract was selected for the in vivo tests for presenting highest yield in the process. Variations in extracts and concentrations did not significantly change the physicochemical properties, firmness (kg cm-2), total soluble solids (ºBrix) and weight loss (%) when compared to the control. However, in vivo treatment with Tween 20 or even associated with aqueous extract reduced the appearance of anthracnose symptoms in fresh papaya fruits.