Micropopagação e conservação in vitro de plantas medicinais de interesse ao SUS: Mentha x villosa Huds e Vernonia condensata Baker

Abstract

Mentha x villosa Huds e Vernonia condensata Baker são espécies de plantas medicinais nativas do Brasil, que possuem grande potencial para sanar problemas gastrointestinais. Devido à importância medicinal e por estas serem obtidas principalmente através do extrativismo predatório, o que pode levar a erosão genética das espécies, estudos relacionados à multiplicação e conservação in vitro se fazem necessários. Assim, este trabalho teve como objetivo, estabelecer um protocolo para o cultivo in vitro das espécies Mentha x villosa Huds e Vernonia condensata Baker, visando o estabelecimento de uma coleção in vitro de plantas medicinais de interesse ao SUS. Para isso, alguns estudos foram conduzidos, sendo o primeiro relacionado à multiplicação e conservação in vitro de hortelã. Na micropropagação de hortelã avaliou-se o efeito de diferentes concentrações de BAP (0,0; 0,5; 1,0 e 1,5 mg L-1) no meio de cultura MS após 60 dias de cultivo de segmentos nodais, utilizando as variáveis percentual de explantes responsivos (explantes com desenvolvimento de brotos) e o número de brotações por explantes. As plantas resultantes foram aclimatizadas e após 30 dias avaliou-se o percentual de sobrevivência. Para a conservação in vitro de hortelã foram utilizados segmentos nodais de plantas oriundas da micropopagação, sendo avaliadas diferentes concentrações do meio MS (MS, MS/2 e MS/4) e distintas concentrações de sacarose (15 e 30 g L-1). Com 30 e 120 dias de cultivo foram avaliadas as características altura de planta, número de folhas senescentes, número de ramificações e número de raízes. No segundo, relacionado à conservação in vitro do alumã, segmentos nodais foram cultivados nas mesmas concentrações do meio de cultura MS e de sacarose avaliadas na pesquisa com hortelã. Além disso, avaliou-se a temperatura dos ambientes de cultivo: sala de crescimento com temperatura de 25 ± 1ºC e BOD com temperatura de 20 ± 1ºC. Após 30 e 120 dias de cultivo, as plantas foram avaliadas através das características descritas anteriormente, substituindo apenas o número de ramificações por número de folhas verdes. Observou-se que a adição do BAP na concentração de 1,5 mg L-1proporcionou a máxima proliferação de brotos na multiplicação in vitro de hortelã, sendo constatado 100% de sobrevivência das plantas após a aclimatização. Além disso, verificou-se que o meio MS a 1/4 de sua concentração e adição de 30 g L-1 de sacarose foi eficiente para a conservação in vitro da espécie Mentha x villosa Huds. Para a conservação in vitro da espécie Vernonia condensata Baker as melhores respostas em relação à condição de crescimento mínimo foram verificadas utilizando o meio de cultura MS a 1/4 de sua concentração e adição de 30 g L-1 de sacarose, na temperatura de 25ºC. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT Mentha x villosa Huds and Vernonia condensata Baker are native Brazilian medicinal plants widely used to treat gostrointestinal disorders. Their medicinal importance and the fact that they are obtained through predatory extractivism, which can cause genetic erosion, justifies in vitro multiplication and conservation studies. The aim of this research was to develop a protocol for in vitro culture of Mentha x villosa Huds and Vernonia condensata Baker in order to build up a collection of medicinal plants of interest to the Unified Health System (SUS). To attain our objective we studied firstly the in vitro multiplication and conservation of mint. With regard to mint micropropagation, the effect of different BAP concentrations (0.0; 0.5; 1.0 and 1.5 mg L-1) in MS culture media on the percentage of responsive explants (explants with shoots) and the number of shoots per explant after a sixty day culture of nodal segments was assessed. The resulting plants were acclimatized for 30 days after which the survival percentage was evaluated. Nodal segments of micropropagated mint plants were used for in vitro conservation in different MS (MS, MS/2 and MS/4) and sucrose concentrations (15 and 30 g L1). After 30 and 120 days plant height, number of senescent leaves, branching, and number of roots were assessed. In the second set of experiments we studied the in vitro conservation of Vernonia condensata Baker. Nodal segments were cultured in the same conditions described above for Mentha x villosa Huds. We also evaluated the culture room temperature: growth room at 25 ± 1ºC and BOD at 20 ± 1ºC. After 30 and 120 days the same traits analyzed in M. villosa were assessed in V. condensata just substituting number of green leaves for number of ramifications. The addition of 1.5 mg L-1 BAP resulted in maximum shoot proliferation and 100% survival after acclimatization when considering mint in vitro multiplication. Besides, the MS concentration of 1/4 MS medium with 30 g L-1 of sucrose were efficient for M. villosa in vitro conservation. Minimum growth requirements for V. condensata in vitro conservation were attained in media containing 1/4 of MS with 30 g L-1 sucrose at 25ºC.