Triagem com novas espécies fúngicas capazes de biossintetizar nanoparticulas de prata

Abstract

O reino Fungi reúne uma diversidade estimada entre 11.7 a 13.2 milhões de espécies fúngicas, atualmente agrupadas em 18 filos de acordo com a filogenia molecular. São caracterizados por suas estruturas morfológicas, vias reprodutivas e metabolismo. A amplitude de nichos ecológicos ocupados pelos fungos e sua eficiência metabólica na execução de atividades desperta o interesse industrial. Nanopartículas de prata (AgNPs) tem grande potencial antimicrobiano e são consideradas como potenciais substitutos dos antibióticos, especialmente no contexto de resistência antibacteriana. A obtenção das AgNPs pela via biológica oferece vantagens econômica e ambiental, pois dispensa gastos energéticos e não produz resíduos tóxicos. Basidiomicetos e ascomicetos são citados como potenciais fontes de AgNPs. Contudo, a capacidade de biossintetizar AgNPs não é inerente a todas as espécies fúngicas, razão que justifica a realização deste trabalho. O objetivo desta pesquisa foi identificar os isolados fúngicos, recentemente descritos e encontrados em ambiente de restinga capazes de secretar a redutase necessária para obtenção de AgNPs. Os isolados Aspergillus bezerrae, Aspergillus oxumiae, Latorua sp. 11EM7, Neoscytalidium sp. 70EM7, Nigrograna sp. 24M3, Penicillium reconvexovelosoi, Tremateia sp. 36EM5 e Trichoderma sp. MTS17A foram cultivados em meio líquido, posteriormente seus respectivos extratos foram filtrados e adicionados em solução com nitrato de prata (AgNO3). Foram realizadas análises espectroscópicas de luz UV-Vis. Suspensão dos extratos fúngicos em quatro volumes diferentes foram testadas contra o cultivo de Staphylococcus aureus pela técnica de difusão em poço. Visualmente a biossíntese de AgNPs foi observada por meio da mudança de cor do meio reagente. Cinco dos oitos isolados testados apresentaram pico de absorção de 320nm, exceto Penicillium reconvexovelosoi com banda em 450nm. Halos de inibição no crescimento de S. aureus foram visualizados em extratos de seis espécies, especialmente naqueles de maior volume de AgNP. Os dados obtidos corroboram sobre o potencial antimicrobiano das AgNP. Análises de microscopia eletrônica de transmissão serão realizadas futuramente, para confirmação da biossíntese e identificação quanto ao seu tamanho e formato. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT The kingdom Fungi brings together an estimated diversity of between 11.7 and 13.2 million fungal species, currently grouped into 18 phyla according to molecular phylogeny. They are characterized by their morphological structures, reproductive pathways and metabolism. The breadth of ecological niches occupied by fungi and their metabolic efficiency in carrying out activities arouses industrial interest. Silver nanoparticles (AgNPs) have great antimicrobial potential and are considered as potential replacements for antibiotics, especially in the context of antibacterial resistance. Obtaining AgNPs by biological means offers economic and environmental advantages, as it does not require energy expenditure and does not produce toxic residues. Basidiomycetes and ascomycetes are cited as potential sources of AgNPs. However, the ability to biosynthesize AgNPs is not inherent to all fungal species, which is why this work was carried out. The objective of this research was to identify the fungal isolates, recently described and found in resting environment capable of secreting the reductase necessary to obtain AgNPs. The isolates Aspergillus bezerrae, Aspergillus oxumiae, Latorua sp. 11EM7, Neoscytalidium sp. 70EM7, Nigrograna sp. 24M3, Penicillium reconvexovelosoi, Tremateia sp. 36EM5 and Trichoderma sp. MTS17A were cultivated in liquid medium, later their respective extracts were filtered and added in solution with silver nitrate (AgNO3). Spectroscopic analyzes of UV-Vis light were performed. Suspension of fungal extracts in four different volumes were tested against the cultivation of Staphylococcus aureus by the well diffusion technique. Visually, the biosynthesis of AgNPs was observed through the color change of the reagent medium. Five of the eight isolates tested showed an absorption peak at 320nm, except for Penicillium reconvexovelosoi with a band at 450nm. Inhibition halos in the growth of S. aureus were visualized in extracts of six species, especially in those with higher volume of AgNP. The data obtained corroborate the antimicrobial potential of AgNP. Transmission electron microscopy analyzes will be performed in the future to confirm biosynthesis and identify its size and shape.